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反相色譜柱的平衡方法

更新時(shí)間:2016-11-21    點(diǎn)擊次數(shù):3978
 反相色譜柱的平衡方法

    聚合物基質(zhì)的反相色譜柱采用了聚甲基丙烯酸酯聚合物,制備而成具有不同孔徑和粒徑大小的各種規(guī)格的產(chǎn)品。TSKgel 聚合物基質(zhì)反相色譜柱適用于較寬的pH范圍,即使在高pH下也具有很好的重復(fù)性。這類色譜柱在pH2-12下表現(xiàn)出極其穩(wěn)定的化學(xué)特性。因此,在硅膠基質(zhì)色譜柱適用受限的堿性pH下仍然可以使用。

    反相色譜柱載經(jīng)過(guò)出廠測(cè)試后是保存在乙腈-水中的;由于色譜柱在儲(chǔ)存或運(yùn)輸過(guò)程中固定相可能會(huì)干擾,這會(huì)引起鍵合相的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,因此,新的色譜柱在用來(lái)分析樣品之前,請(qǐng)一定要充分平衡色譜柱。

    反相色譜柱的平衡方法是:以純乙腈或甲醇作為流動(dòng)相,首先用低流速0.2ml/min將色譜柱平衡過(guò)夜(請(qǐng)注意斷開液相色譜儀檢測(cè)器)。 

    然后,將流速增加到0.8ml/min沖洗30min以便將色譜柱的填料充分平衡至zui佳狀態(tài)。平衡過(guò)程中,將流速緩慢地提高至獲得穩(wěn)定的基線,這樣可以保證色譜柱的使用壽命,并保證在以后的使用中,獲得分析結(jié)果的重現(xiàn)性。

    請(qǐng)一定確保所使用的流動(dòng)相和乙腈-水互溶。如果您所使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽,應(yīng)注意首先用20倍柱體積的5%的乙腈-水流動(dòng)相過(guò)渡,然后使用分析樣品的流動(dòng)相直至獲得穩(wěn)定的基線。

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